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ATCC细胞培养贴士
点击次数:106 发布时间:2019-06-14
   ATCC细胞培养贴士:
  细胞株的生长有两种状态,贴壁细胞需要附着在一个表面进行生长(贴壁依赖性),悬浮细胞可在悬浮培养状态下生长(非贴壁依赖)。在细胞单层贴壁生长货悬浮生长中,都通常遵循四个特征性阶段:迟滞期、对数或指数期、静止或平台期及衰退期。
  ATCC细胞特点:
  1.传代情况:p2
  2.活性好、稳定性高、适应性强,易培养
  3.传代快、多:2-3天传一代,普通可传10代以上 肿瘤细胞无限制
  4.纯度高达95% 无污染和其他杂细胞
  5.有技术疑问可以提供一对一的解答:专业,及时,耐心
  6.货期短,少数常见细胞款到两天后可发货,一般冻存管5-7个工作日,复苏7-15个工作日。
  7.如有非人为质量问题,收到细胞后十个工作日内包退换
  ATCC细胞在发货前进行质检:
  1、细胞存种的活性检测
  2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检
  3、衣原体、支原体检测(荧光法、培养法等)
  冻存ATCC细胞的复苏和培养:
  1、先准备好细胞培养皿或细胞培养瓶,及产品说明推荐的相应细胞培养基。并在37℃水浴中预先温热细胞培养基。(请参阅:注1)
  2、小心取出装有细胞的冻存管,保持管盖拧紧,将冻存管盖以下的部分置于37℃水浴中并轻微的搅拌以帮助解冻。解冻过程应该尽快,大约短于2分钟或待最后一块小冰晶体刚融化,就应将细胞冻存管取出水浴。
  3、在水浴中取出的ATCC细胞冻存管表面喷洒70%乙醇配制的消毒剂,用无菌纸巾或纱布拭干。之后的操作步骤都应该遵循在无菌条件下生物安全柜中严格操作。
  4、小心拧开冻存管的顶部,将管内容物用1ml移液枪转移到含9毫升培养基的无菌离心管中。离心5到7分钟(125xg),小心吸去上清液以去除抗冻剂(二甲基亚砜),避免丢失细胞沉淀。将细胞沉淀重悬于配好的完全培养基中。将细胞悬液转移到培养容器,轻轻摇晃使细胞均匀的分布。生长较慢的细胞株可重悬于5-8ml培养基并转移到T25培养瓶。生长较快的细胞株可重悬于12-20ml培养基并转移到T75培养瓶。
  5、将ATCC细胞培养容器置于细胞培养箱,在温度37℃,二氧化碳浓度5%的培养条件下进行孵育。细胞培养24小时后应在显微镜下观察细胞形态和生长状况。
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